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细菌的测定和计量方式有(yǒu)哪些?

对于生物(wù)氧化过程中的细菌,使用(yòng)时需要知道菌液中所含的细菌数量。测定和计量细菌的数量一般有(yǒu)以下几种方法:
(1)比浊法。其原理(lǐ)是因為(wèi)菌體(tǐ)不透光,利用(yòng)菌液所含细菌浓度不同,液體(tǐ)的浑浊度则不同,然后利用(yòng)分(fēn)光光度计测定菌液的光密度。用(yòng)测得的光密度和标准曲線(xiàn)对比,即可(kě)得知菌液的密度。
(2)直接计数法。该方法是利用(yòng)血球计数器(Hemocytometer),直接在显微镜下观察计数所取菌液样品中的细菌数量。
(3)平皿计数法。该方法是将所要测定的菌液取出后,稀释成一定的倍数,用(yòng)固體(tǐ)培养基制成平板,然后在一定的温度下进行培养,使其長(cháng)成菌落(Colony formation unit,CFU),计算出菌落数,再乘以稀释倍数,则得到所测菌液的活菌浓度。
(4)液體(tǐ)稀释法。该方法是将菌液按连续的10倍系列在培养基中稀释成不同的浓度,然后进行培养。经培养后,记录每个稀释度出现生長(cháng)的试管数,然后查**可(kě)能(néng)数表(Most probable number,MPN,见有(yǒu)关微生物(wù)实验教材),根据样品的稀释倍数就可(kě)计算出其中活菌的含量。
(5)细胞干重测定法。该方法是将菌液离心或过滤后,洗涤除去培养基成分(fēn)后转移到适的容器中,置100~105℃干燥箱烘干或低温低压干燥(60~80℃)至恒重后称重。一般细胞干重為(wèi)细胞湿重的10%~20%,对于细菌,一个细胞重约10-12~10-13g。
目前,采用(yòng)较多(duō)的微生物(wù)生長(cháng)测定方法是比浊法、直接计数法和液體(tǐ)稀释法。以上均為(wèi)直接计数方法。此外,也有(yǒu)采用(yòng)蛋白质分(fēn)析方法来估测细菌的数量。
 
 
 

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